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三种消毒剂检测方法分析对比
点击次数:822 发布时间:2018-10-22 返回
  三种消毒剂检测方法分析对比
  对三种消毒剂检测方法戊二醛溶液,二氯异氰尿酸钠溶液系灭枯草杆菌黑色变种芽孢的效果进行了比较。结果, 用欧洲标准悬液定量杀菌试验. 改良欧洲悬液定量杀菌试验和载体浸泡定量杀菌试验检测含戊二醛2% (g/m1)溶液杀灭枯草杆菌黑色变种芽化达消毒合格标准, 作用时间分别为2.5.3.0,2.0 h。用前两方法检测含有效氯4 500 mg/L的二氯异氰尿酸钠溶液及用载体方法检测含有效氯l 000 mg/L该液杀灭枯草杆菌黑色变种芽孢达消毒合格标准,作用时间分别为30,20.10 min。当染菌片的芽孢悬液中增含小牛血清50%(ml/m1)时, 用载体方法检测含有效氯5 000 mg/L的二氯异氰尿酸钠溶液杀灭该芽孢达消毒合格标准,作用时间近20 min, 与用欧洲标准悬液法检测者(30 min)相近 表明三种方法检测受有机物影响较小的戊二醛杀菌效果相差较小,检测受有机物影响较大的二氯异氰尿酸钠杀菌效果相差较大。后者可能与方法中含有机物多少有关。
  消毒剂检测方法
  1、消毒剂检测菌悬液与菌片的制备
  在欧洲标准悬液法和改良欧洲悬液法中, 用含胰蛋白胨0,1% (g/m1) 和氯化钠0,85% (g/m1) 的去离子水溶液(pH6 8~7 0), 将枯草杆菌黑色变种(ATCC9372)芽孢稀释至规定含菌量的悬液。在载体法中, 用含蛋白胨0.1% (g/m1)的磷酸盐缓冲液(PBS, pH 7.2~7,4)制成的枯草杆菌黑色变种芽孢悬液滴染1,0 cm×1,0 cm 布片, 制成菌片。
  2、消毒剂检测中和剂选择试验
  因悬液法中和剂选择试验结果可适用于载体试验中, 故试验用欧洲标准悬液法进行。试验设6组, 第l组到第5组, 皆将0.5 ml含牛血清白蛋白(SIGMA公司产) 3% (g/m1) 的去离子水溶液(过滤除菌后使用) 加入无菌试管中, 再加0,5 ml枯草杆菌黑色变种芽孢悬液, 混匀。然后, 第l、2组均加入4.0 ml消毒剂溶液(用标准硬水配制), 作用至预定时间, 第l组吸取0,5 ml加到含有4.5 ml PBS的试管中, 第2组吸取0,5 ml加到含有4 5 ml中和剂溶液的试管中; 第3组加入4.0 ml中和剂溶液, 作用 预定时间, 吸取0、5 ml加到含有4,5 ml中和剂溶液的试管中; 第4组加入4.0 ml中和产物(1份消毒剂溶液加4份中和剂溶液, 中和作用l0 min) 溶液,作用至预定时间, 吸取0.5 ml加到含有4.5ml中和产物溶液的试管中: 第5组加入4.0ml PBS, 作用至预定时间, 吸取0.5 ml加到含有4.5 ml PBS的试管中。第6组为中和剂溶液、中和产物溶液和胰蛋白胨大豆蛋白胨培养基(TSA)阴性对照。试验结果,以第l组不长菌或长菌量远低于第2组, 第2组长菌量不低于l00 cfu/ml, 第3、4、5组长菌量达5.0×l0 ~5.0×l0。cfu/ml且组间菌数相差不超过l0% , 第6组不长菌, 为所选中和剂合适。
  3、消毒剂检测定量杀菌试验
  欧洲标准悬液定量杀菌试验 向试管内加入0.5 ml含牛血清白蛋白3%(g/m1) 的去离子水溶液和0.5 ml枯草杆菌黑色变种芽孢悬液, 混匀, 再加入4.0 ml消毒剂溶液(阳性对照组为无菌蒸馏水),混匀并立即记时。作用至规定时间, 取0.5ml混悬液, 加于4.5 ml中和剂溶液中, 混匀。中和作用l0 min, 取0.5 ml该液或其稀释液接种无菌平皿, 一式两份。倾注l8~ 20 ml TSA 培养基, 混匀。置(37±1)℃培养72 h, 计数菌落数, 计算杀灭率。
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